Polymerase Chain Reaction، وڏي پيماني تي پي سي آر جي نالي سان سڃاتو وڃي ٿو، ماليڪيولر بائلاجي جي تاريخ ۾ سڀ کان اهم ٽيڪنالاجي پيش رفت جي نمائندگي ڪري ٿو. 1980 جي ڏهاڪي ۾ ترقي ڪئي وئي، هي ٽيڪنڪ هڪ خاص ليبارٽري جي طريقيڪار کان هڪ بنيادي اوزار ڏانهن منتقل ڪيو ويو آهي جيڪو طبي تشخيص، فارنسڪ سائنس، ۽ جينياتي تحقيق ۾ استعمال ٿيندو آهي. سائنسدانن کي ڊي اين اي جو ننڍڙو نمونو وٺڻ ۽ ان کي لکين ڪاپين ۾ وڌائڻ جي اجازت ڏيڻ سان، پي سي آر ان کي ممڪن بڻائي ڇڏيو آهي ته جينز جو تفصيل سان مطالعو ڪيو، انتهائي درستي سان پيٿوجنز کي ڳولي، ۽ جينياتي نشانن کي سڃاڻڻ، جيڪي اڳ ۾ معياري تجزياتي طريقن سان پوشيده هئا.
پي سي آر پروسيس هڪ ليبارٽري ٽيڪنڪ آهي جيڪو هڪ مخصوص ڊي اين اي سيگمينٽ جي ڪيترن ئي ڪاپيون ٺاهڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي درجه حرارت جي تبديلين جي هڪ چڪر ذريعي، جنهن ۾ ڊينيچريشن، اينيلنگ ۽ ايڪسٽينشن شامل آهي، هڪ خاص پي سي آر مشين ۽ گرمي-مستحڪم ڊي اين اي پوليمريز جي مدد سان.
پي سي آر جي عمل جي پيچيدگين کي سمجھڻ ضروري آهي ليبارٽري پروفيسر، طبي محقق، ۽ صنعتي ٺاهيندڙن لاء جيڪي تشخيصي سامان ۾ شامل آهن. جيئن ته تيز رفتار ۽ صحيح ماليڪيولر ٽيسٽنگ جي طلب عالمي سطح تي وڌندي رهي ٿي، ان جي قابل اعتماد پي سي آر مشين ڪامياب ليبارٽري جي نتيجن جو بنياد بڻجي ٿي. هي آرٽيڪل اعليٰ معيار جي ڊي اين اي ايمپليفڪيشن ۽ مضبوط تجرباتي نتيجن کي يقيني بڻائڻ لاءِ PCR عمل جي مرحلن، گرمي پد ۽ مشيني ضرورتن لاءِ هڪ جامع گائيڊ مهيا ڪري ٿو.
مضمون جو خلاصو جدول
| سيڪشن |
خلاصو |
| PCR ڇا آهي؟ |
پي سي آر هڪ ماليڪيولر بائيولاجي ٽيڪنڪ آهي جنهن کي استعمال ڪيو ويندو آهي خاص ڊي اين اي جي ترتيبن کي تيزيءَ سان وڌائڻ لاءِ مختلف هيٺاهين واري ايپليڪيشنن لاءِ. |
| PCR لاء ڇا گهربل آهي؟ |
ڪامياب پي سي آر لاءِ هڪ ٽيمپليٽ ڊي اين اي، پرائمر، نيوڪليوٽائيڊس، هڪ مستحڪم ڊي اين اي پوليميرس، ۽ هڪ اعليٰ صحت واري حرارتي سائيڪل جي ضرورت آهي. |
| PCR جا 4 مرحلا ڇا آهن؟ |
اهو عمل هڪ منطقي تسلسل جي پيروي ڪري ٿو شروعاتي، ڊينيچريشن، اينيلنگ، ۽ واڌ جي ڊي اين اي مواد کي هر چڪر کي ٻيڻو ڪرڻ لاء. |
| پي سي آر مشين جا مرحلا ڇا آهن؟ |
سامان پاڻمرادو درست درجه حرارت جي منتقلي کي يقيني بڻائي ٿو، يقيني طور تي بايو ڪيميڪل رد عملن کي درست گهربل وقفن تي واقع ٿينديون آهن. |
| denature قدم لاء استعمال ٿيل درجه حرارت ڇا آهي؟ |
تيز گرمي پد، عام طور تي 94 ° C ۽ 98 ° C جي وچ ۾، هائڊروجن بانڊ کي ٽوڙڻ ۽ ڊبل- اسٽرينڊ ڊي اين اي کي الڳ ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي. |
| annealing قدم دوران ڇا ٿيندو؟ |
ھن مرحلي دوران، گرمي پد کي گھٽايو ويندو آھي پرائمر کي خاص طور تي پابند ڪرڻ جي اجازت ڏيڻ لاء انھن جي مڪمل ھدف جي ترتيبن تي ھڪڙي ڀريل ڊي اين اي تي. |
| توسيع جي قدم لاء استعمال ٿيل درجه حرارت ڇا آهي؟ |
اهو قدم عام طور تي 72 ° C تي ٿئي ٿو، هڪ نئين ڊي اين اي اسٽرينڊ کي ٺهڪائڻ لاءِ Taq پوليمريز لاءِ بهترين درجه حرارت. |
| پي سي آر جي درجه حرارت جي وهڪري ڇا آهي؟ |
وهڪري ۾ تيز، گهٽ ۽ وچولي درجه حرارت جي تيز رفتار سائيڪلنگ جو نمونو شامل آهي جيڪو ٻيهر ورجائي ٿو جيستائين گهربل ڪنسنٽريشن تائين پهچي وڃي. |
PCR ڇا آهي؟
PCR، يا Polymerase Chain Reaction، ھڪڙو تبديليءَ وارو ماليڪيولر بائيولاجي طريقو آھي جيڪو تيزيءَ سان ھڪڙي مخصوص ڊي اين اي نموني جون لکين کان بلين ڪاپيون پيدا ڪرڻ لاءِ ٺاھيو ويو آھي.
ان جي بنيادي طور تي، پي سي آر هڪ 'حياتياتي فوٽوڪپيئر' طور ڪم ڪري ٿو. ان جي ايجاد کان اڳ، ڊي اين اي کي وڌائڻ هڪ سست ۽ مشڪل عمل هو جنهن ۾ ڊي اين اي کي بيڪٽيريا ۾ ڪلوننگ شامل آهي. جي اچڻ سان پي سي آر مشين ، محقق هاڻي جينوم جي هڪ مخصوص جين يا حصي کي الڳ ڪري سگهن ٿا ۽ ان کي ڪجهه ڪلاڪن ۾ وڌائي سگهن ٿا. اها صلاحيت تمام ضروري آهي ڇاڪاڻ ته اڪثر بايو ڪيميڪل تجزين لاءِ ڊي اين اي جي وڏي مقدار جي ضرورت هوندي آهي هڪ ماپبل سگنل پيدا ڪرڻ لاءِ، ۽ قدرتي نمونا اڪثر ڪري صرف مقدار جو پتو لڳائيندا آهن.
هن ٽيڪنالاجي جي استحڪام مختلف صنعتن ۾ ايپليڪيشنن جي مختلف قسمن ۾ ظاهر ٿئي ٿي. ڪلينڪل سيٽنگن ۾، اهو وائرل لوڊ ڳولڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي، جهڙوڪ COVID-19 يا ايڇ آئي وي ٽيسٽ ۾. فارنزڪس ۾، اهو تحقيق ڪندڙن کي اجازت ڏئي ٿو ته هو ماڻهن جي سڃاڻپ ڪرڻ لاء حياتياتي مواد جي خوردبيني نموني. صنعتي شعبي ۾، پي سي آر کاڌي جي شين جي پاڪائي کي يقيني بڻائي ٿو ۽ جينياتي طور تي تبديل ٿيل جاندارن جي ڳولا. سمجھڻ PCR ٽيڪنالاجي جا اصول ۽ قيمتون اهم آهن انهن ليبز لاءِ جيڪي انهن جي تشخيصي صلاحيتن کي اپ گريڊ ڪرڻ جي ڪوشش ڪري رهيا آهن.
PCR لاء ڇا گهربل آهي؟
هڪ ڪامياب پي سي آر رد عمل کي پنجن بنيادي حصن جي ضرورت آهي: ڊي اين اي ٽيمپليٽ، مخصوص پرائمر، ڊي آڪسينيو ڪليوٽائڊ ٽرافاسفٽس (ڊي اين ٽي پيز)، هڪ گرمي-مستحڪم ڊي اين اي پوليمريس (جهڙوڪ Taq)، ۽ هڪ خاص بفر حل.
DNA ٽيمپليٽ اصل بليو پرنٽ جي طور تي ڪم ڪري ٿو جيڪو توهان نقل ڪرڻ چاهيو ٿا. پرائمر ننڍا آهن، ڊي اين اي جا مصنوعي ٽڪرا جيڪي حدف جي ترتيب جي شروعات ۽ پڇاڙيءَ سان ملائڻ لاءِ حسب ضرورت ٺهيل آهن. ان کان سواء، ڊي اين اي پوليمريز کي خبر ناهي ته نئين اسٽينڊ جي تعمير جي شروعات ڪٿي ٿيندي. dNTPs (A، T، C، ۽ G) خام عمارت جا بلاڪ آھن جيڪي اينزيم نئين ڊي اين اي زنجير جي تعمير لاء استعمال ڪندا آھن.
ساڳئي طرح اهم آهي ماحول جنهن ۾ رد عمل ٿئي ٿي. بفر هڪ مستحڪم ڪيميائي ماحول فراهم ڪري ٿو، خاص طور تي پي ايڇ ۽ ميگنيشيم آئنز جي ڪنسنٽريشن تي ڌيان ڏيڻ، جيڪي ڊي اين اي پوليمريز اينزيم لاءِ ضروري ڪوفيڪٽرز آهن. آخرڪار، ردعمل جي جسماني عمل جي ضرورت آهي هڪ اعلي ڪارڪردگي حرارتي سائيڪلر، اڪثر ڪري پي سي آر مشين جي طور تي حوالو ڏنو ويو آهي ، جيڪو صحيح طور تي ڪنٽرول ڪري ٿو تيز رفتار جي تبديلين کي رد عمل جي هر اسٽيج کي شروع ڪرڻ لاء.
PCR مکس جا اهم اجزاء
سانچو ڊي اين اي : نمونو جنهن ۾ ٽارگيٽ جي ترتيب شامل آهي.
ڊي اين اي پوليمريز : عام طور تي Taq پوليمريز، جيڪو تيز گرمي پد تي سرگرم رهي ٿو.
پرائمر : اڳتي ۽ ريورس اسٽرينڊ جيڪي ايمپليفڪيشن جون حدون بيان ڪن ٿا.
dNTPs : چار نيوڪليوٽائيڊ بيسز جيڪي ڪاپيئر لاءِ 'انڪ' طور ڪم ڪن ٿا.
بفر ۽ آئنز : اينزيميٽڪ ڪارڪردگي ۽ استحڪام کي برقرار رکندو آهي.
PCR جا 4 مرحلا ڇا آهن؟
پي سي آر جو عمل چار بنيادي فنڪشنل مرحلن تي مشتمل آهي: شروعات، ڊينيچريشن، اينيلنگ، ۽ ايڪسٽينشن (جنهن کي ايلونگيشن پڻ سڏيو ويندو آهي).
پهريون مرحلو، شروعات، هڪ دفعي واقعو آهي جتي رد عمل واري چيمبر کي تيز گرمي پد تي گرم ڪيو ويندو آهي انهي کي يقيني بڻائڻ لاءِ ته ڊي اين اي پوليمريز مڪمل طور تي چالو آهي ۽ ڪنهن به آلودگي کي غير جانبدار ڪيو وڃي ٿو. ان کان پوءِ، Denaturation جو چڪر شروع ٿئي ٿو، جتي ڊبل-اسٽرينڊ ڊي اين اي الڳ ٿي وڃي ٿو. ان کان پوءِ انيلنگ آهي، جتي پرائمر پنهنجا مقصد ڳوليندا آهن، ۽ آخر ۾ ايڪسٽينشن، جتي نئون ڊي اين اي ٺهندو آهي. هي ٽي مرحلو چڪر (Denaturation، Annealing، Extension) 25 کان 40 ڀيرا ورجايو ويندو آهي.
ڇاڪاڻ ته ڊي اين اي جو مقدار هر ڪامياب چڪر سان ٻيڻو ٿيندو آهي، ترقي انتهائي تيز آهي. مثال طور، 30 چڪر کان پوء، ڊي اين اي جو هڪ واحد ماليڪيول هڪ ارب کان وڌيڪ نقلن ۾ تبديل ٿي سگهي ٿو. اها ڪارڪردگي جيڪا ٺاهي ٿي جديد ليبارٽري تھرمل سائيڪلون جديد سائنس لاءِ تمام ضروري آھن. اعليٰ معيار ۾ مليل تيز رفتار حرارتي ۽ کولنگ بلاڪن کان سواءِ جي پي سي آر مشين ، اهو عمل تمام گهڻو سست هوندو ته عملي استعمال لاءِ اعليٰ معيار جي تشخيصي ماحول ۾.
پي سي آر مشين جا مرحلا ڇا آهن؟
پي سي آر مشين جي قدمن ۾ گرمي پد جي خودڪار سائيڪلنگ شامل آهي هڪ ٿرمل بلاڪ جي صحيح اليڪٽرانڪ ڪنٽرول ذريعي، ريمپ جي شرح کي منظم ڪرڻ، وقت کي برقرار رکڻ، ۽ فائنل کولنگ.
هڪ پي سي آر مشين ڪم ڪري ٿي Peltier عناصر کي تيزيءَ سان گرم ڪرڻ ۽ ٿڌي ڪرڻ لاءِ هڪ ڌاتو بلاڪ جيڪو رد عمل جي نلڪن کي رکي ٿو. مشين جي نقطه نظر کان 'قدم' ۾ شامل آهي 'Ramp'، جيڪو گرمي پد جي وچ ۾ منتقلي جي رفتار آهي، ۽ 'Hold'، جيڪو اهو عرصو آهي جيڪو مشين کي مخصوص درجه حرارت برقرار رکي ٿي. هاء-آخر مشينون ٺهيل آهن تمام تيز رفتار ريمپ جي شرحن کي منتقلي ۾ خرچ ٿيل وقت کي گھٽائڻ لاء، جيڪو غير مخصوص بائنڊنگ يا اينزيم جي تباهي جي خطري کي گھٽائي ٿو.
مشين اندر سافٽ ويئر صارفين کي پيچيده پروٽوڪول پروگرام ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿو. ھن ۾ شامل آھي ابتدائي گرمي پد، ٽن مکيه مرحلن جا ورجائيندڙ لوپ، ۽ آخري ھولڊ قدم ٿڌي درجه حرارت (عام طور تي 4 ° C) تي نمونن کي محفوظ ڪرڻ لاءِ جيستائين ٽيڪنيشن انھن کي واپس وٺي سگھي. تي جديد ڊجيٽل انٽرفيس پي سي آر مشين پڻ رد عمل جي حقيقي وقت مانيٽرنگ جي اجازت ڏين ٿا، انهي کي يقيني بڻائي ٿو ته حرارتي پروفائل بلڪل پيروي ڪئي پئي وڃي جيئن وڌ کان وڌ ٻيهر پيداوار لاءِ پروگرام ڪيو ويو آهي.
denature قدم لاء استعمال ٿيل درجه حرارت ڇا آهي؟
Denaturation قدم عام طور تي 94 ° C ۽ 98 ° C جي وچ ۾ گرمي پد کي استعمال ڪري ٿو ته جيئن ڊي اين اي اسٽينڊن جي وچ ۾ هائڊروجن بانڊن کي ٽوڙڻ جي سهولت لاء.
هن انتهائي گرمي ۾، ڊي اين اي جي ڊبل هيلڪس ساخت غير مستحڪم ٿي ويندي آهي. هائڊروجن بانڊ جيڪي ايڊينائن-ٿائيمين ۽ سائٽوسين-گوانائن جوڙو گڏ ڪن ٿا، اهي ڳري ويندا آهن، نتيجي ۾ ڊي اين اي جا ٻه آزاد سنگل اسٽرينڊ هوندا آهن. اهو ايندڙ قدمن لاءِ هڪ اهم شرط آهي، جيئن پرائمر ۽ ڊي اين اي پوليميرس اينزائم صرف سنگل اسٽرينڊ ٽيمپليٽس سان رابطو ڪري سگهن ٿا. جيڪڏهن گرمي پد تمام گهٽ آهي، ته ڊي اين اي مڪمل طور تي الڳ نه ٿيندو، جنهن جي نتيجي ۾ ناڪامي يا غير موثر واڌارو ٿيندو.
تنهن هوندي، هن درجه حرارت کي برقرار رکڻ لاء هڪ انتهائي مضبوط ڊي اين اي پوليمريز جي ضرورت آهي. اهو ئي سبب آهي ته Taq پوليميرس جي دريافت، جيڪا گرمي پيارڻ واري بيڪٽيريا Thermus aquaticus کان الڳ هئي ، تمام انقلابي هئي. معياري اينزايمز 95 ° C تي تباهه ٿي ويندا، پر Taq ڪم ڪري ٿو. ليبارٽرين کي لازمي طور تي يقيني بڻائڻ گهرجي ته انهن جي پي سي آر مشين سڀني کوهن ۾ هڪجهڙائي واري حرارت فراهم ڪري ٿي ته جيئن ”ٿڌن هنڌن“ کي روڪڻ لاءِ جتي ڊينيچريشن ناڪام ٿي سگهي ٿي، جيڪا هڪ اهم خصوصيت آهي. اعلي معيار جي ماليڪيولر حياتيات جو سامان.
PCR جي annealing قدم دوران ڇا ٿيندو؟
annealing قدم دوران، گرمي پد 50 ° C ۽ 65 ° C جي وچ ۾ گھٽجي ويندي آهي، ڊي اين اي پرائمر کي انهن جي مڪمل ترتيبن تي پابند ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿي هڪ واحد ڀريل ڊي اين اي ٽيمپليٽس تي.
اهو قدم معقول طور تي پي سي آر جي عمل جو سڀ کان وڌيڪ حساس حصو آهي. استعمال ٿيل مخصوص درجه حرارت استعمال ٿيل پرائمر جي پگھلڻ جي درجه حرارت (Tm) تي منحصر آهي. جيڪڏهن گرمي پد تمام گهڻو آهي، پرائمر ٽيمپليٽ تي پابند نه ٿيندا. جيڪڏهن اهو تمام گهٽ آهي، پرائمر شايد انهن ترتيبن سان جڙيل هوندا جيڪي صرف 'جزوي طور تي' هڪجهڙا هوندا آهن، جن جي ڪري غير مخصوص واڌارو ۽ گندا نتيجا نڪرندا آهن. PCR مشين کي لازمي طور تي هن حدف جي درجه حرارت کي اعلي درجي جي درستگي سان مارڻ جي قابل هوندو (اڪثر ڪري 0.1 ° C جي اندر).
annealing قدم جي مدت عام طور تي 20 کان 40 سيڪنڊ آهي. هن مختصر ونڊو دوران، پرائمر رد عمل جي ميلاپ کي ماليڪيولر موشن ذريعي نيويگيٽ ڪندا آهن ۽ ٽارگيٽ سائيٽ تي اسنيپ ڪندا آهن. هڪ دفعو پرائمر annealed ٿي ويا آهن، اهي ڊي اين اي پوليميرس لاء هڪ شروعاتي نقطي مهيا ڪن ٿا نيوڪليوٽائڊس شامل ڪرڻ شروع ڪرڻ لاء. اهو صحيح همراه اهو آهي جيڪو هڪ پيچيده حياتياتي نموني ۾ مخصوص جينياتي ميوٽيشنز يا پيٿوجنز کي ڳولڻ جي اجازت ڏئي ٿو، پروفيشنل تشخيصي مشينن ۾ سيڙپڪاري ڪلينڪل ليبز لاءِ ترجيح آهي.
توسيع جي قدم لاء استعمال ٿيل درجه حرارت ڇا آهي؟
توسيع وارو مرحلو عام طور تي 72 ° C تي ڪيو ويندو آهي، جيڪو نئين ڊي اين اي اسٽرينڊ کي ٺهڪائڻ لاءِ گرمي-مستحڪم ڊي اين اي پوليمريس لاءِ بهترين فنڪشنل درجه حرارت آهي.
72 ° C تي، ڊي اين اي پوليميرس اينزيم پنهنجي اعلي ڪارڪردگي تي آهي. اهو پرائمر سائيٽ تي شروع ٿئي ٿو ۽ dNTPs شامل ڪرڻ شروع ٿئي ٿو پرائمر جي 3 'آخر ۾، ٽيمپليٽ اسٽينڊ سان گڏ هلڻ. اينزائم ٽيمپليٽ کي 'پڙھي ٿو' ۽ نئين اسٽرينڊ ۾ مڪمل ڪندڙ بنياد رکي ٿو. مثال طور، جيڪڏهن ٽيمپليٽ ۾ ايڊينائن آهي، پوليميرس هڪ ٿامين شامل ڪري ٿو. هن ردعمل جي رفتار شاندار آهي؛ Taq پوليمريس اٽڪل 1,000 بنيادي جوڙو في منٽ شامل ڪري سگھي ٿو.
ھن مرحلي لاءِ وقت جي ڊگھائي تي منحصر آھي ڊي اين اي سيڪشن جي ڊگھائي نقل ڪئي پئي وڃي. جيڪڏھن ھدف جو سلسلو 1,000 بنيادي جوڙو ڊگھو آھي، واڌ جو مرحلو ھڪڙي منٽ لاءِ مقرر ٿي سگھي ٿو. جيڪڏھن ھدف ننڍو آھي، وقت گھٽائي سگھجي ٿو مجموعي پروسيسنگ وقت بچائڻ لاءِ. کي يقيني بڻائڻ ته پي سي آر مشين هن مرحلي ۾ 72 ° C کي برقرار رکي مڪمل ڊگھي ڊي اين اي اسٽينڊ جي مڪمل ٿيڻ لاءِ ضروري آهي.
PCR جي درجه حرارت جي وهڪري ڇا آهي؟
پي سي آر جي گرمي پد جي وهڪري جي ورهاڱي واري چڪر کي تيز گرمي جي خرابي، گهٽ گرمي جي اينيلنگ، ۽ وچولي گرمي جي واڌ جي پٺيان لڳندي آهي، هڪ 'sawtooth' تھرمل پروفائل ٺاهي ٿي.
هي وهڪرو ڊي اين اي مقدار جي جاميٽري ترقي کي وڌائڻ لاء ٺهيل آهي. هڪ عام ڊوڙ ۾، مشين 95°C تي 2 منٽن لاءِ شروع ٿئي ٿي (ابتدائي Denaturation)، پوءِ هڪ لوپ داخل ٿئي ٿي: 30 سيڪنڊن لاءِ 95°C، 30 سيڪنڊن لاءِ 55°C، ۽ 60 سيڪنڊن لاءِ 72°C. هي لوپ 30 ڀيرا ورجائي ٿو. آخرڪار، 5-10 منٽن لاءِ 72°C تي هڪ 'فائنل ايڪسٽينشن' آهي، انهي ڳالهه کي يقيني بڻائڻ لاءِ ته سڀ سنگل اسٽرينڊ ڊي اين اي مڪمل طور تي ڊبل اسٽرينڊ ٿيل آهي ان کان اڳ جو مشين کي اسٽوريج لاءِ 4°C تي ٿڌو ٿئي.
هن درجه حرارت جي وهڪري جي درستگي PCR جي پيداوار جي پيداوار ۽ پاڪائي تي سڌو سنئون اثر انداز ڪري ٿي. جيڪڏهن وهڪري متضاد آهي، اينزيم سرگرمي وڃائي سگهي ٿي يا پرائمر 'پرائمر ڊائمرز' ٺاهي سگھن ٿا، جيڪي بنيادي طور تي رد عمل جي بيڪار نموني آهن. انهي جي ڪري، جي انشانکن ۽ حرارتي يونيفارميت پي سي آر مشين ڪنهن به ليبارٽري جي ماليڪيولر تشخيص يا تحقيق جي ڪارڪردگي لاء سڀ کان اهم عنصر آهن.
گرمي جي وهڪري جو خلاصو جدول
| مرحلو |
عام درجه حرارت |
مقصد |
| شروعات ڪرڻ |
94°C - 96°C |
اينزيم کي چالو ڪري ٿو، پيچيده ڊي اين اي کي رد ڪري ٿو. |
| رد ڪرڻ |
94°C - 98°C |
ڊبل اسٽرينڊ ڊي اين اي کي الڳ ڪري ٿو اڪيلو تارن ۾. |
| اينيلنگ |
50°C - 65°C |
پرائمر کي ھدف واري ترتيب سان پابند ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿي. |
| واڌارو |
72 ° سي |
ڊي اين اي پوليميرس نئين ڊي اين اي اسٽريڊس کي گڏ ڪري ٿو. |
| فائنل رکو |
4°C - 10°C |
وڌايل پيداوار جي مختصر مدت جي اسٽوريج. |
نتيجو
Polymerase Chain Reaction هڪ خوبصورت ۽ طاقتور اوزار آهي جنهن حياتياتي سائنس جي منظرنامي ۾ انقلاب آڻي ڇڏيو آهي. ڊينيچريشن، اينيلنگ ۽ ايڪسٽينشن جي محتاط قدمن تي عمل ڪندي، سائنسدان ڊي اين اي جي اندر موجود رازن کي انلاڪ ڪري سگھن ٿا، پيچيده طبي ۽ فرانزڪ سوالن جا جواب مهيا ڪري سگھن ٿا. هن عمل جي ڪاميابيءَ جو دارومدار تمام گهڻو انحصار ريجنٽس جي معيار تي آهي ۽ پي سي آر مشين جي درستگي تي آهي جيڪا حرارتي چڪر کي هلائڻ لاءِ استعمال ٿيندي آهي.
ڪنهن به ليبارٽري لاءِ مسلسل ۽ قابل اعتماد نتيجا حاصل ڪرڻ لاءِ، گرميءَ جي ڪنٽرول ۽ چڪر جي انتظام جي نزاڪت کي سمجهڻ ضروري آهي. ڇا توهان بنيادي تحقيق ڪري رهيا آهيو يا وڏي مقدار جي ڪلينڪل تشخيص، سامان جو انتخاب ۽ بهتر پروٽوڪولن جي پيروي توهان جي ڪم جي درستگي کي بيان ڪندي. انهن لاءِ جيڪي هڪ ماليڪيولر ليب قائم ڪرڻ جي منطقي طرف ۾ دلچسپي رکن ٿا ، ان جي ڳولا جديد پي سي آر سسٽم جون قيمتون ۽ ٽيڪنيڪل وضاحتون توهان جي تشخيصي صلاحيتن کي اڳتي وڌائڻ ۾ ايندڙ منطقي قدم آهي.
